2023 / 01

Следующая статья
DOI: 10.47183/mes.2023.002

МЕТОД

Идентификация фосфонилированных пептидов с применением МАЛДИ-мишени, функционализированной стеаратом лантана

В. Н. Бабаков1, А. Ю. Горбунов1, А. С. Гладчук2,4, Я. К. Калниня2, В. В. Шиловских4, Н. В. Томилин2, Н. Г. Суходолов3,4, А. С. Радилов1, Е. П. Подольская2,3
Информация об авторах

1 Научно-исследовательский институт гигиены, профпатологии и экологии человека Федерального медико-биологического агентства, Санкт-Петербург, Россия

2 Научно-клинический центр токсикологии имени С. Н. Голикова Федерального медико-биологического агентства, Санкт-Петербург, Россия

3 Институт аналитического приборостроения Российской академии наук, Санкт-Петербург, Россия

4 Санкт-Петербургский государственный университет, Санкт-Петербург, Россия

Для корреспонденции: Владимир Николаевич Бабаков
г.п. Кузьмоловский, ст. Капитолово, корп. 93, Ленинградская обл, Россия; ur.hcepg@vokabab

Информация о статье

Благодарности: авторы выражают благодарность за техническую поддержку ресурсным центрам «Развитие молекулярных и клеточных технологий» и «Геомодель» Научного парка СПбГУ, а также А. А. Селютину за возможность работы с МАЛДИ масс-спектрометрическим оборудованием.

Статья получена: 11.11.2022 Статья принята к печати: 11.01.2023 Опубликовано online: 28.01.2023
|
Рис. 1. А. Капля водной субфазы. Б. Нанесение раствора стеариновой кислоты в н-гексане. В. Распределение органической фазы по подложке. Г, Д. Изображение ячеек МАЛДИ-мишени после нанесения одного и шести слоев FLa (стереомикроскоп SMZ 1500 с цифровой камерой DS-2MBWc (Nikon; Япония). Е. СЭМ-изображение шести слоев FLa, сформированных на МАЛДИ-мишени (сканирующий электронный микроскоп S-3400N; Hitachi, Japan).
Рис. 2. Масс-спектр пептического гидролизата СА человека, модифицированного PFMP, при соотношении модифицированной формы к немодифицированной, равном 1 : 10. А. Масс-спектр исходного образца. Б. Масс-спектр несвязавшейся фракции. В. Масс-спектр, полученный с пятна сорбента после МАХ. Г. Идентификация модификации PFMP по нейтральной потере
Рис. 3. Результаты МАХ(FLa)-МАЛДИ-МС-анализа триптического гидролизата БХЭ (1 мг/мл), модифицированой PFMP при соотношении модифицированной формы к немодифицированной 100 : 0 (А); 1 : 10) (Б); 1 : 100 (В)
Рис. 4. Результаты МАХ(FLa)-МАЛДИ-МС-анализа образцов плазмы крови, инкубированной с PFMP. Представлены масс-спектры контрольных образцов (А, Б); аддуктов VRY(PFMP)TKKVPQVST и SVTLFGES(MPA)AGAASVSLHLLSPGSHSLFTR, концентрация PFMP — 10 нг/мл (В, Г); аддуктов VRY(PFMP)TKKVPQVST и SVTLFGES(MPA)AGAASVSLHLLSPGSHSLFTR, концентрация PFMP — 1 нг/мл (Д, Е)
Рис. 5. Результаты МАХ-МАЛДИ-МС-анализа образцов 7-го профессионального теста ОЗХО по анализу биомедицинских проб. А. МАЛДИ-масс-спектр триптического гидролизата БХЭ, модифицированной VХ, сигнал с m/z 3034,5397 — SVTLFGES(Vx)AGAASVSLHLLSPGSHSLFTR. Б. МАЛДИ-масс-спектр триптического гидролизата БХЭ, модифицированной GE, сигнал с m/z 3062,5650 — SVTLFGES(GE)AGAASVSLHLLSPGSHSLFTR
Таблица 1. Результаты исследования селективности метода при разбавлении СА, модифицированного PMPF, плазмой крови человека
Таблица 2. Чувствительность МАХ-МАЛДИ-МС-анализа пептических пептидов СА и триптических пептидов БХЭ, модифицированных PMPF