ISSN Print 2306-6326
ISSN Online 2713-2773
Медицина Экстремальных Ситуаций
НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКИЙ РЕЦЕНЗИРУЕМЫЙ ЖУРНАЛ ФМБА РОССИИ
ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
In vitro оценка иммуногенности хондроцитов, полученных из индуцированных плюрипотентных стволовых клеток с нокаутом B2M
Информация об авторах
1 Федеральный научно-клинический центр физико-химической медицины имени Ю. М. Лопухина Федерального медико-биологического агентства, Москва, Россия
2 Институт биологии развития имени Н. К. Кольцова, Москва, Россия
Для корреспонденции: Анна Александровна Баринова
ул. Малая Пироговская, д. 1а, 119435, г. Москва, Россия; ur.liam@la.anna.avonirab
Информация о статье
Финансирование: получение хондроцитарных производных из ИПСК выполнено в рамках государственного задания №122032300191-2 «Органоид-22». Иммуноцитохимический и ПЦР-анализы экспрессии хондрогенных макеров в хондроцитарных проиводных ИПСК, а также оценка иммуногенности этих хондроцитарных производных проводились в рамках проекта РНФ #22-15-00250 «Сравнение хондрогенного потенциала хрящевой ткани, полученной с помощью первичных культур хондроцитов и дифференцированных производных индуцированных плюрипотентных стволовых клеток».
Благодарности: М. Богомяковой, Л. Беликовой из лаборатории клеточной биологии ФНКЦ ФХМ имени Ю. М. Лопухина ФМБА России за помощь в планировании и проведении эксперимента.
Вклад авторов: А. А. Баринова — проведение иммунологических тестов, подготовка и написание статьи, поиск литературы; А. С. Пикина — получение хондроцитов пациента и дифференцировка ИПСК в хондроцитарные производные, проведение ИЦХ; П. А. Голубинская — поиск литературы; Е. С. Ручко — проведение ПЦР; А. В. Еремеев — редактирование статьи.
Соблюдение этических стандартов: исследование одобрено этическим комитетом ФНКЦ ФХМ (протокол № 2019/02 от 09 апреля 2019 г.)
Статья получена: 15.11.2023
Статья принята к печати: 15.01.2024
Опубликовано online: 05.02.2024
|
Рис. 1. Иммуноцитохимический анализ монослойных культур. Синим окрашены ядра клеток, красным и зеленым — исследуемые маркеры. Размер масштабной линейки (показано желтым) составляет 100 мкм — для iCh и iCh_dB2M, 1000 мкм — для iPS
Рис. 2. Относительная экспрессия хондроцитарных маркеров в линиях хондроцитов человека (Chondro), хондроцитарных производных с нокаутом B2M (iCh_dB2M) (А) и без нокаута B2M (iCh) (Б). * — статистически значимые различия по экспрессии гена в сравнении с хондроцитами человека, р < 0,05, непарный тест Стьюдента
Рис. 3. Цитометрический анализ активации CD8+-Т-лимфоцитов. А. Схема гейтирования. Б. Процент активации CD8+-Т-лимфоцитов при кокультивации с iPS (слева) и iCh-dB2M (справа). В. Сравнительный анализ активации CD8+-Т-лимфоцитов после пятидневной кокультивации с линиями-мишенями. Г. Сравнительный анализ активации CD8+-Т-лимфоцитов после суточной кокультивации с линиями-мишенями. * — p < 0,05; * * — p < 0,01, непарный тест Стьюдента
Рис. 4. Сравнительный анализ дегрануляции CD8+-Т-лимфоцитов после пятичасовой кокультивации с линиями-мишенями. Непарный тест Стьюдента, * — p < 0,05; * * — p < 0,01
Таблица 1. Использованные в работе праймеры
